課程名稱 |
生物產業工程實習 Bio-industrial Engineering Practice |
開課學期 |
101-2 |
授課對象 |
生物機電工程學系 |
授課教師 |
陳林祈 |
課號 |
BME3103 |
課程識別碼 |
611 31200 |
班次 |
07 |
學分 |
1 |
全/半年 |
半年 |
必/選修 |
必修 |
上課時間 |
星期二6,7,8(13:20~16:20) |
上課地點 |
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備註 |
本系限學號末二位除以9餘7。
第一堂課在知207室集合,再行分發各組。 總人數上限:20人 |
Ceiba 課程網頁 |
http://ceiba.ntu.edu.tw/1012bioexp |
課程簡介影片 |
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核心能力關聯 |
核心能力與課程規劃關聯圖 |
課程大綱
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為確保您我的權利,請尊重智慧財產權及不得非法影印
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課程概述 |
EXP1: 傳統的PCR程序必須經由後續處理程序(如:電泳與分光光度計定量)才有辦法得知產物是否有被擴增,和定量樣品擴增前後的核酸總量。近年來,利用螢光分子參與PCR擴增程序的概念所衍伸出的即時定量PCR (Real-time qPCR)程序逐漸被生命科學研究相關領域所重視。透過Real-time qPCR的技術,使用者可以即時對PCR的擴增程序進行觀測,並且利用螢光訊號的改變對產物進行定量。目前依照其偵測方式可大略分為兩類:非專一性偵測(如:Sybr Geen與Eva Green…等)與專一性偵測(如:TaqMan與Molecular beacon…等)。此外因為每一循環中PCR產量皆以螢光訊號被記錄下來,在某一循環螢光訊號強度預先設定的閥值時,此時的循環數稱為CT值(Threshold Cycle)。此值與起始的模板量具有反比的關係。經由量測不同起始濃度的模板擴增程序之CT值(Threshold Cycle),做出標準取曲線(CT值為縱座標,模板起始量為橫座標),如此可以得知未知樣品的起始濃度與擴增效率,進而得到樣品最終產量。由於此技術大大的減少檢測複雜性與增加檢測靈敏度與速度,因此也被廣泛地運用在病毒或細菌感染、癌症診斷、用藥反應的檢測上。
此外本次實驗並會介紹給大家關於電泳的技術與原理。電泳(Electrophoresis)是生物化學實驗中常見的定性分析與純化方法,此方法是藉由蛋白質與核酸分子本身的帶電性不同與分子量的差異,能用以電場的方式將其分離,並配合分子量指示劑的使用,即能判斷實驗所得蛋白質或核酸分子之分子量是否與預期結果相符合。本實驗將利用洋菜瓊酯膠(Agarose gel)進行核酸電泳,並使用特殊嵌入式螢光染劑Ethidium Bromide (EtBr)進行核酸呈色,以完成核酸定性的分析。
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課程目標 |
Exp 1:
1.瞭解即時定量PCR技術與電泳技術之原理與概念
2.學習核酸放大技術與電泳操作與純化技術
3.探討核酸電泳分析方法與延伸應用
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課程要求 |
根據本系生物產業工程實習之規定 |
預期每週課後學習時數 |
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Office Hours |
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指定閱讀 |
課程講義 |
參考書目 |
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評量方式 (僅供參考) |
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週次 |
日期 |
單元主題 |
第1週 |
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1.即時定量聚合脢連鎖反應(qPCR)原理、儀器設計與病原檢測應用 |
第2週 |
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2.微陣列生物晶片(microarray)製作、儀器分析與基因檢測應用 |
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